|
Dondurularak Kurutulmuş Çay (Camellia sinensis)
Yapraklarındaki
Yüksek
Fenolik’lerden RNA’nın İzolasyonu
Maya Rani Jaiprakkash,
Beena
Pillai, Purna Venkatesh,
Subramanian
N, Vilas P. Sinkar
ve Parag P. Sadhale
Hindistan
Bilim Enstitüsü, Mikrobiyoloji ve Hücre
Biyolojisi Bölümü
Moleküler
Bitki Biyolojisi
Raporları 21:
465a–465g,
Aralık 2003
Özet
Küçük bir modifikasyon ile,
liyofilize olmuş (dondurularak kurutulmuş) çay yapraklarında
guanidine
hydrochloride’nin kullanılırlığını ilk olarak, RNA izolasyonu uygulama
protokolü müz de rapor etmiştik. Bitki
dokuları, özellikle geniş çaplı genom profilini
açıklayan araştırmalarda, hasat (toplama) aşamasında
korunmalıdır. Taze yaprak
dokuları doğal habitatlarından laboratuara kadar ultra düşük
sıcaklıklarda
transfer edilebilmeleri olanaklı değildir. Çay yapraklarından
RNA izolasyonu
için liyofilize edilmiş dokuların kullanılabilirliğini inceledik.
Yüksek
RNA verimi elde edilmiş (~500 μg/gr yaprak dokusunun kuru ağırlığı) ve
RNA;
microarray analizleri rezerv transkripsiyon ve Northern blotting‘i de
kapsayan
tüm moleküler biyolojik metotlarla test edilmeye uygun
bulunmuştur. Dondurularak
kurutulmuş
yaprak dokularından elde edilen RNA’nın; yüksek kaliteli,
bozulmamış ve tüm
çok yönlü uygulamalar için kullanılacağını
göstermiş olduk.
Kaynak:
Maya Rani
Jaiprakkash, Beena Pillai, Purna Venkatesh,Subramanian N, Vilas P.
Sinkar ve Parag
P. Sadhale 2003. RNA Isolation From
High-Phenolic Freeze-Dried Tea (Camellia sinensis)
Leaves. Plant
Molecular Biology Reporter 21: 465a–465g, December
2003. Department
of Microbiology and Cell Biology, Indian Institute of
Science,Bangalore-560012,
India; 2Unilever Research India, 64, Whitefield Road, Bangalore-560066,
India;
3Present address, Institute of Genomics and Integrative Biology, New
Delhi, 110
007 India.
|
Guanidine
hydrochloride metodu kullanılarak liyofilize edilmiş çay yaprağı
örneklerinden
toplam izole edilen RNA’nın eletroforetik deseni
|
|
|
|
|